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高速離心機的幾種分離技術(shù)方法的你都了解嗎?

更新時間:2020-08-12      點擊次數(shù):1772
       高速離心機的幾種分離技術(shù)方法:
  A.差速離心:逐次增加離心力,每次可沉降樣品溶液中的一些組份。
  差速離心是一種較常用的方法。在這種方法中,離心管在開始時裝滿了均一的樣品溶液。通過在一定速度下一定時間的離心后,就可得到兩個部份:沉淀和上清液。
  通常在離心時把大部分不需要的大粒子沉降去掉。這時所需的組份大部分仍留在上清液中。然后將收集到的上清液以更高速度離心,把所需的粒子沉積下來。離心的時間要選擇得當(dāng),使大部份不需要的更小的粒子仍留在上清液中。對于得到的沉淀和上清液可以進行進一步的離心,直到達到所需要的分離純度為止。差速離心的特點是操作簡單,但分離純度不高。
  B.密度梯度離心法:可以同時使樣品中幾個或全部組份分離,具有很好的分辨率。
  1)速率區(qū)帶法:
  根據(jù)樣品中不同粒子所具有的不同的尺寸大小及沉降速度(S)。大致步驟如下:
  在離心管中裝入密度梯度溶液,溶液的密度從離心管頂部底部逐漸增加(正梯度)。
  將所需分離的樣品小心地加密度梯度溶液的頂部。高速離心機屬常規(guī)實驗室用離心機,廣泛用于生物,化學(xué),醫(yī)藥等科研教育和生產(chǎn)部門 ,它利用轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強大離心力,分離液體與固體顆粒或液體混合物中各組分,適用于微量樣品快速分離合成。樣品在梯度溶液表面形成一負(fù)梯度。
  由于不同大小的粒子在離心力作用下,在梯度中移動的速度不一樣,所以經(jīng)過離心后會形成幾條分開的樣品區(qū)帶。冷凍離心機就是利用離心力使得需要分離的不同物料得到加速分離的機器。冷凍離心機有分為低速、高速冷凍離心機,以及超速分析、制備兩用冷凍離心機等多種型號。
  注意:樣品粒子的密度大于梯度液注中任一點的密度。離心過程在區(qū)帶到達管子底部前停止。
  2)等密度(單位:g/cm3或kg/m3)離心法:
  根據(jù)粒子的不同密度來分離。離心過程中,粒子會移與它本身密度相同的地方形成區(qū)帶。
  密度樣度的選擇要使梯度的范圍包括所有待分離粒子的密度。樣品可以在密度梯度液粒上面或均勻分布在密度梯度中。經(jīng)離心后,樣品粒子達到它們的平衡點。
  注意:平衡后粒子的分離由其密度決定,與時間無關(guān),此時再改變離心轉(zhuǎn)速,只能改變區(qū)帶的相對位置。
  2.密度梯度分析法
  梯度介質(zhì)性質(zhì)與選擇:
  應(yīng)具備的性質(zhì) :
  梯度物質(zhì)的選擇原則是滿足分離方法的基本要求,一個理想的密度材料標(biāo)準(zhǔn)它應(yīng)是:
  所形成的溶液密度應(yīng)包括所需要的密度范圍。
  具有某些性質(zhì),如折射率,據(jù)此可測定它的濃度。
  所形成的溶液粘度低。
  不損傷所分離的樣品。
  離心分離后容易除去。
  不妨礙分離積分的分析。
 

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